光學顯微鏡放大倍數的估算
光學顯微鏡放大倍數的估算
光學顯微鏡可分為體視顯微鏡、正置顯微鏡和倒置顯微鏡。它們廣泛應用于生物學、材料科學、礦物和食品安全等各個領域。受光學顯微鏡使用的光源和填充介質的限制,光學顯微鏡的極限分辨率可低至200 nm。小于200nm的觀察物體需要用激光共聚焦顯微鏡、超分辨熒光顯微鏡、掃描電子顯微鏡、原子力顯微鏡等觀察清楚。光學顯微鏡對物體的放大作用不是放大物體的整個區域。物體,而是放大物體的長度或寬度。一般情況下,人眼在明視距離范圍內能分辨的最小物體為0.1-0.3mm。用光學顯微鏡觀察物體時,物體放大多少倍才能用人眼觀察清楚?本文給出了光學顯微鏡放大倍數的簡單估算。
光學顯微鏡的倍率有兩種計算方法:
(1)光學放大倍數。光學放大率是指從顯微鏡目鏡觀察到的物體的放大效果。這種放大結果稱為光學放大。光學倍率的計算比較簡單,即物鏡倍率×目鏡倍率。以體視顯微鏡放大倍數的計算為例,連續變倍體為0.7-4.5,目鏡為10倍,則該體視顯微鏡的放大倍數為7-45倍。如果顯微鏡有物鏡和目鏡,那么直接將物鏡放大倍數×目鏡放大倍數相加就可以得到顯微鏡的總放大倍數。
(2) 數字放大。數字放大通常是指物體通過外部設備成像后的放大倍數。目前市場上有很多三目顯微鏡,通過CCD與計算機、液晶顯示器等成像設備相連,進行成像觀察。與外部設備進行這種連接后,物體被放大了多少倍?給出了兩種計算方法。
(a) 如果有被觀測物體實際尺寸的準確數據,可以通過以下公式計算:物體的實際放大倍數=物體的放大尺寸/物體的實際尺寸。如果物體的實際尺寸為2 μm,在顯示器上成像后,可以用尺子測量成像物體的長度。如果測量的物體長度為 2 毫米,則將物體放大 1000 倍。
(b) 如果對物體的大小沒有明確的概念,可以通過以下公式計算。
數碼倍率=物鏡倍率××連接環放大倍數
公式中參數說明:
--物鏡放大倍數是指所用顯微鏡物鏡的放大倍數,如5倍、10倍、20倍等;
--連接環的放大倍數是指三目界面的放大倍數,一般為1倍,也有0.35、0.5倍;
--25.4×屏幕尺寸,就是將屏幕尺寸換算成mm,1英寸=25.4mm;
--CCD對角線的長度是指CCD的芯片尺寸,通常為1/3英寸、1/2英寸或2/3英寸,對應的長度為6mm、8mm或11mm。
注:數字放大公式計算的數值,在實際應用中,還需要考慮屏幕上的像素數。如果像素數少,則難以觀察較小尺寸的物體。
計算示例:
(1)金相顯微鏡觀察電路板的焊錫
顯微鏡參數:物鏡放大倍數20倍,目鏡放大倍數10倍,三目接口1倍,CCD對角線1/3英寸,顯示尺寸19英寸。
光學倍率=物鏡倍率×目鏡倍率=20×10=200倍
數碼倍率=物鏡倍率××連接環長度 倍率=20××1=1608.67倍
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