電泳儀的分類使用方法和注意事項
電泳儀的分類使用方法和注意事項
電泳是實現電泳分析的儀器。一般由電源、電泳槽、檢測單元等組成。所謂電泳是指帶電粒子在電場中的運動。不同的物質因其不同的電荷和分子量而在電場中以不同的速度運動。在此基礎上,可以對不同的物質進行定性或定量分析,也可以將某種混合物組合起來。子分析或單個組分提取制備。
常用電泳設備的基本結構包括:電源、電泳槽和附加裝置。結構配置分為立式和臥式電泳儀。
電泳儀工作原理:
它能吸附溶液中帶電粒子或帶有可解離基團的粒子,如蛋白質、氨基酸等,在一定的pH條件下,在直流電場中,不可避免地會被具有相反電特性的電極吸引而移動。不同物質的粒子在電場中的運動速度不僅與其帶電狀態和電場強度有關,還與介質的大小、形狀和粘度有關。根據這一特點,電泳的應用可用于不同物質的定性或定量分析,或某種混合物的成分分析或單成分提取制備。電泳儀就是根據上述原理設計制造的。
影響電泳的因素很多,主要包括被分離物質的電荷量、電場強度、緩沖液的pH值和離子強度、支持介質的化學惰性等。
電泳儀分類:
根據電泳中是否使用支持介質,分為自由電泳和區帶電泳。
游離電泳不使用支持介質,電泳在溶液中進行。這種類型的電泳分為非自由界面電泳和自由界面電泳兩種。非自由界面電泳是指懸浮在溶液中的所有帶電粒子(如各種細胞)通電后都運動,不出現界面,如微電泳。在自由界面電泳中,分離的物質集中在某一層,形成各自的界面,用于定性或定量分析。自由界面電泳需要昂貴且精密的電流儀器,僅用于等電聚焦、等速電泳等少數特殊電泳。
區帶電泳使用支持介質。根據支持介質不同,分為濾紙電泳、醋酸纖維素膜電泳、薄層電泳和凝膠電泳。此外,根據支持介質的不同裝置形式,可分為水平板電泳、垂直板電泳、垂直盤電泳、毛細管電泳、橋式電泳和連續流電泳。
幾種常用的電泳儀器有:
1、全自動熒光/可見光雙系統電泳儀
具有熒光/可見光雙系統,使用熒光試劑項目如CK,LD同工酶。優點:靈敏度高,精度高,高壓低溫系統,速度非常快。
2、全自動醋酸纖維素膜電泳儀
是可見光單系統,采用醋酸纖維素膜電泳片,優點是自動化程度較高。多用于臨床常規血清蛋白電泳分析。
3、全自動瓊脂糖電泳儀
為單一可見光系統,采用瓊脂糖凝膠電泳膜,具有靈敏度高的優點,可用于低濃度蛋白質檢測,如尿蛋白和腦脊液蛋白,同工酶的分離效果也相當好,具有更多的項目和更高的靈敏度。
4、全自動電泳分析系統
本電泳儀結合了上述儀器的優點,自動點樣、電泳、著色(或染色、脫色)、干燥。可使用多種電泳片,包括瓊脂片、醋酸片、聚丙烯酰胺等,是一種理想的采用可見光和熒光顯色雙系統的電泳儀。
電泳儀的使用方法:
1、先用導線將電泳槽的兩個電極與電泳儀的直流輸出端連接起來,注意不要接反。
2、將電泳儀電源開關調至關閉位置,電壓旋鈕調小,根據工作需要選擇電壓和電流量程。
3. 打開電源,緩慢轉動電壓調節旋鈕,直到達到所需電壓,設置電泳終止時間,然后開始電泳。
4、工作完成后,轉動旋鈕開關至零位或關閉狀態,拔出電泳插頭。
電泳儀使用注意事項:
1、電泳儀通電進入工作狀態后,嚴禁人體接觸電極、電泳等可能帶電的部位,也不得在電泳槽內取放東西。請先關閉電源,以免觸電。同時儀表必須有良好的接地端子,防止漏電。
2、儀器通電后,請勿臨時加拔輸出引線插頭,以防短路。雖然儀器內部有保險絲,但短路仍可能對儀器造成損壞。
3.由于不同介質支架的電阻值不同,電泳時通過的電流量也不同,游動的速度和游到最后所需的時間也不同,所以不同介質支架的電泳不應在同一臺電泳儀上同時進行。
4、當總電流不超過儀器額定電流(大電流量程)時,可以多槽聯合使用,但注意不要過載,否則容易影響儀器壽命。
5.在某些特殊情況下,當需要檢查儀器的電泳輸入時,允許處于穩定狀態空載啟動,但必須先接好負載再以穩態啟動,否則電壓表指針跳動很大,容易造成不必要的人為損壞。
6、在使用過程中如發現異常現象,如巨響、放電、異味等,必須立即切斷電源進行維修,以免發生事故。
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